Комплет за геномска ДНК на растенијата TGuide

А-1 Ниска концентрација на клетки или вирус во почетниот примерок-Збогатете ја концентрацијата на клетки или вируси.

А-2 Недоволна лиза на примероците-Примероците не се измешани темелно со тампон за лиза. Се препорачува темелно да се меша со пулс-вител 1-2 пати. - Недоволна клеточна лиза предизвикана од намалување на активноста на протеиназата К. - Недоволна лизна клетка или деградација на протеини поради недоволно топло време за капење. Се предлага да се исече ткивото на мали парчиња и да се продолжи времето за капење за да се отстранат сите остатоци во лизатот.

А-3 Недоволна адсорпција на ДНК. -Без додавање на етанол или низок процент, наместо 100% етанол, пред да се пренесе лизатот во спин колоната.

A-4 pH вредноста на тампон за елузија е премногу ниска. -Прилагодете ја pH вредноста помеѓу 8,0-8,3.

Остаток на етанол во елуентот.

- Во елуентот има преостанат пуфер за миење PW. Етанолот може да се отстрани со центрифугирање на центарот за центрифугирање 3-5 минути, а потоа ставање на собна температура или инкубатор на 50 for за 1-2 мин.

А-1 Примерокот не е свеж. - Извлечете позитивен примерок од ДНК како контрола за да одредите дали ДНК во примерокот е деградирана.

А-2 Несоодветен пред-третман. - Предизвикано од прекумерно мелење течен азот, враќање на влага или преголема количина на примерокот.

Предтретманите треба да варираат за различни примероци. За примероци од растенија, проверете дали темелно се меле во течен азот. За примероци од животни, хомогенирајте или темелно мелете во течен азот. За примероци со клеточни wallsидови што тешко се кршат, како што се бактерии G+ и квасец, се предлага да се користат лизозим, литиказа или механички методи за кршење на клеточните идови.

4992201/4992202 Комплет за геномична ДНК на растенија усвојува метод базиран на колона за кој е потребен хлороформ за екстракција. Особено е погоден за разни примероци од растенија, како и сув прав од растенија. Комплет за растенија Hi-DNAsecure е исто така базиран на колони, но без потреба од екстракција од фенол/хлороформ, што го прави безбеден и нетоксичен. Погоден е за растенија со висока содржина на полисахариди и полифенол. 4992709/4992710 DNAquick Plant System усвојува метод на база на течност. Исто така, не е потребна екстракција од фенол/хлороформ. Постапката за прочистување е едноставна и брза, без ограничување на почетните количини на примерокот, така што корисниците можат флексибилно да ја прилагодат количината според експерименталните барања. Голема големина на фрагменти од gDNA може да се добијат со висок принос.

Геномската ДНК беше извлечена од различни количини на примероци од човечка целосна крв со помош на TIANamp Blood DNA Kit. Резултатите се како што следува. Резултатите се наведени само како референца, вистинските резултати од екстракција зависат од условите на примероците.

Екстракцијата на ДНК од згрутчување на крвта може да се изврши со помош на реагенсите дадени во овие два комплети со едноставно менување на протоколот во специфична инструкција за екстракција на ДНК од згрутчување на крвта. Меката копија од протоколот за екстракција на ДНК од згрутчување на крвта може да се издаде на барање.

Суспендирајте го свежиот примерок со 1 ml PBS, нормален солен раствор или ТЕ пуфер. Целосно хомогенизирајте го примерокот со хомогенизатор и соберете го талогот до дното на цевката со центрифугирање. Отстранете го супернатантот и продолжете го талогот со 200 μl тампон GA. Следното прочистување на ДНК може да се изврши според упатството.

За прочистување на gDNA во примероци од плазма, серум и телесна течност, се препорачува TIANamp Micro DNA DNA Kit. За прочистување на вирусна gDNA од серумски/плазма примероци, се препорачува TIANamp Virus DNA/RNA комплет. За прочистување на бактериската gDNA од серумски и плазма примероци, се препорачува TIANamp Bacteria DNA Kit (лизозимот треба да биде вклучен за позитивна бактерија). За примероци од плунка, се препорачува ДНК комплет Hi-Swab и ДНК комплет TIANamp Bacteria.

Комплет за растенија DNAsecure или систем за растенија DNAquick се препорачуваат за екстракција на геном од габи. За екстракција на геном од квасец, се препорачува TIANamp квасец ДНК комплет (литиказата треба да се подготви самостојно).