■ Висока флексибилност: Диви опсег на почетен волумен на примерок, погоден за екстракција на примерок со голем волумен во една реакција.
■ Висок принос: Методот на врнежи го максимизира приносот на РНК во примерокот.
■ Широка употреба: Погоден за многу различни примероци како што се растително и животинско ткиво, култивирани клетки, крв, телесна течност итн.
■ Брза работа: Геномска ДНК може да се добие во рок од 1 час.
Тип: Врз основа на врнежи
Пример: Вирус, бактерии, габи, животинско, растително ткиво, култивирани клетки и телесна течност.
Цел: РНК
Време на работа: ~ 1 час
Апликации: Универзалниот реагенс TRNzol ја минимизира контаминацијата на нечистотии како што се ДНК и протеини во прочистената вкупна РНК, и може директно да се користи за различни експерименти со молекуларна биологија, како што се Северна размачкана, размачкана точка, скрининг PolyA, ин витро превод, RNase заштита анализа, изградба на библиотека cDNA , RT-PCR, PCR во реално време и секвенционирање со висока пропусност.
Сите производи може да се прилагодат за ODM/OEM. За детали,кликнете на Приспособена услуга (ODM/OEM)
Метод: 30 мг ткиво на црниот дроб од стаорци, 100 мг лисја од ориз беа собрани со мелење на течен азот; 1 × 106Култивирани клетки на HepG2 и 700 μl медиум за култура Saccharomyces Cerevisiae (OD600 = 0,9) беа собрани со центрифугирање. 1 мл ТРНзол Универзален Реагенс од ТИАНГЕН и соодветните производи од добавувачот Л и Т беа додадени на секој примерок од примерокот и екстракција на РНК беше извршена по протоколите обезбедени од секој добавувач. Волуменот на елуција беше 80 μl, 50 μl, 30 μl и 30 μl за четирите примероци соодветно. 3 μl од елуатот беа вчитани по лента.
MIII: TIANGEN Маркер III;
Електрофорезата беше спроведена на 6 V/cm 30 минути на 1% агароза.
Резултати: Универзалниот реагенс TIANGEN TRNzol може да извлече висока чистота и добар интегритет РНК од црниот дроб на стаорци, лисја од ориз, култивирани клетки и примероци од квасец, со висока ефикасност. Квалитетот на РНК е споредлив или малку повисок од оној на производителите на добавувачи Л и Т.
А-1 Клеточна лиза или хомогенизација не е доволна
---- Намалете ја употребата на примерокот, зголемете ја количината на тампон за лиза, зголемете ја хомогенизацијата и времето на лиза.
А-2 Количината на примерокот е преголема
---- Намалете ја количината на примерок што се користи или зголемете ја количината на тампон за лиза.
А-1 Недоволна лизна клетка или хомогенизација
---- Намалете ја употребата на примерокот, зголемете ја количината на тампон за лиза, зголемете ја хомогенизацијата и времето на лиза.
А-2 Количината на примерокот е преголема
---- Ве молиме погледнете го максималниот капацитет за обработка.
РНК А-3 не е целосно елуирана од колоната
---- По додавање вода без RNase, оставете ја неколку минути пред центрифугирање.
А-4 етанол во елуентот
---- По испирање, центрифугирајте повторно и отстранете го пуферот за перење колку што е можно повеќе.
Медиумот за култура А-5 Cell не е целосно отстранет
---- Кога собирате клетки, ве молиме да го отстраните медиумот за култура колку што е можно повеќе.
А-6 Клетките складирани во RNAstore не се ефикасно центрифугирани
---- Густината на RNA продавницата е поголема од просечниот медиум за клеточна култура; така што центрифугалната сила треба да се зголеми. Се предлага да се центрифугира на 3000x g.
А-7 Ниска содржина и изобилство на РНК во примерокот
---- Користете позитивен примерок за да одредите дали нискиот принос е предизвикан од примерокот.
А-1 Материјалот не е свеж
---- Свежите ткива треба веднаш да се складираат во течен азот или веднаш да се стават во реагенсот RNAstore за да се обезбеди ефект на екстракција.
А-2 Количината на примерокот е преголема
---- Намалете го износот на примерокот.
А-3 RNase контаминацијаn
---- Иако баферот даден во комплетот не содржи RNase, лесно е да се контаминира RNase за време на процесот на екстракција и треба внимателно да се ракува.
А-4 Загадување со електрофореза
---- Заменете го баферот за електрофореза и проверете дали потрошниот материјал и баферот за полнење се ослободени од контаминација со RNase.
А-5 Премногу оптоварување за електрофореза
---- Намалете го количеството на оптоварување на примерокот, оптоварувањето на секој бунар не треба да надминува 2 μg.
А-1 Количината на примерокот е премногу голема
---- Намалете го износот на примерокот.
A-2 Некои примероци имаат висока содржина на ДНК и може да се третираат со DNase.
---- Изведете DNase третман без RNase на добиениот раствор на РНК, и РНК може директно да се користи за последователни експерименти по третманот, или може дополнително да се прочисти со комплети за прочистување на РНК.
За стаклени производи, печени на 150 ° C 4 часа. За пластични садови, потопени во 0,5 M NaOH 10 минути, потоа темелно исплакнете со вода без RNase и потоа стерилизирајте за целосно отстранување на RNase. Реагенсите или растворите што се користат во експериментот, особено водата, мора да бидат без RNase. Користете вода без RNase за сите препарати за реагенс (додадете вода во чисто стаклено шише, додадете DEPC до конечна концентрација од 0,1% (V/V), протресете преку ноќ и автоклав).
Од своето основање, нашата фабрика развива производи од прва светска класа со почитување на принципот
со квалитет прво. Нашите производи се здобија со одлична репутација во индустријата и вредна доверба меѓу новите и старите клиенти.